Nathalie Bassil

Système De Biopuce Optique en Temps Réel: Application Au Diagnostic Génétique Nathalie Bassil French edition

L'Imagerie par Résonance des Plasmons de Surface permet de suivre en temps réel, en parallèle et sans marqueurs, différentes interactions se déroulant sur une surface métallique. Elle sert à l?analyse des interactions ADN/ADN. Ainsi, des ADN biotinylés ont été fixés sur une surface d'or. L'analyse des interactions a montré que le système employé permet de distinguer la formation d'un double brin totalement complémentaire de celle d'un double brin avec une mutation. Cette distinction est nette pour une délétion. Le cas plus subtil d'une substitution a entrainé l?étude de l'effet de la longueur des ADN sur la réponse du système. Cette investigation a fait ressortir l'influence de la température de fusion des séquences sur le signal obtenu. La représentation des résultats en fonction de ce dernier paramètre a permis de les modéliser, d'expliquer la différence de comportement des diverses molécules et de prédire le résultat des hybridations entre oligonucléotides. Un ensemble de séquences capable de révéler six des plus fréquentes mutations de la mucoviscidose ont été conçues. Les résultats expérimentaux sont en bon accord avec les résultats théoriques.